视黄酸诱导基因蛋白-I在胃癌组织的表达及临床意义

作者：邓海峰; 沈琼; 李敏; 冯珺; 陈陆俊; 吴昌平; 蒋敬庭^*

来源：中华实验外科杂志, 2018, 35(12): 2305-2309.

• 视黄酸诱导基因蛋白-Ⅰ
• 胃癌
• RNA干扰
• 免疫组织化学

目的观察视黄酸诱导基因蛋白-I(RIG-I)在胃癌组织中的表达,探讨RIG-I干预对人胃癌细胞株的功能调节作用。方法免疫组织化学检测胃癌组织芯片癌及癌旁组织中RIG-I表达,秩和检验比较癌及癌旁组织中RIG-I表达差异,χ2检验分析RIG-I表达与临床病理参数的关系,Log-rank分析RIG-I表达与患者预后的关系,Cox模型评价不同指标的预后价值。选用人胃癌细胞株SGC-7901及AGS,经RNAi技术构建RIG-I稳定下调表达细胞株,分别通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot进行验证,并通过细胞计数试剂盒(CCK-8)细胞增殖实验、划痕实验及Transwell实验探讨RIG-I干预对上述胃癌细胞株生物学功能的调节作用。结果胃癌组织中RIG-I表达水平显著低于癌旁组织(U=1490,P=0.001)。病理分级Ⅲ～Ⅳ级的患者,肿瘤组织中RIG-I高表达比率(68.18%)显著低于Ⅰ～Ⅱ级的患者(94.12%,χ2=4.668,P=0.031)。RIG-I高表达患者其术后生存期较低表达患者显著延长(P=0. 023)。COX模型分析结果显示年龄(P=0.047)、TNM分期(P=0.039)、RIG-I高表达(P=0.007)可作为评估胃癌患者预后的独立风险因素。经过RNAi及慢病毒转染,选用SGC-7901和AGS成功构建RIG-I稳定下调表达细胞株LV-RIG-I-短发卡RNA(shRNA)及对照组LV-NC。CCK-8实验表明在培养后48 h及72 h,LV-RIG-I-shRNA组吸光度(A)值显著高于LV-NC组(SGC7901:P=0.000及P=0. 000; AGS:P=0.002及P=0.016);划痕实验显示LV-RIG-I-shRNA组细胞迁移能力显著高于LV-NC组(SGC7901:P=0.001;AGS:P=0. 004);Transwell侵袭实验表明,LV-RIG-I-shRNA组细胞侵袭数量显著多于LV-NC组(SGC7901:P=0. 032;AGS:P=0.016)。结论 RIG-I在胃癌的发生及发展中具有重要作用,胃癌细胞中RIG-I的下调表达可显著促进细胞增殖、侵袭及迁移能力。

• 单位
  苏州大学附属第三医院