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摘要
【目的】探究子宫内膜炎引发奶牛屡配不孕的内在机制。【方法】采用分泌物观察和迪夫染色液检查嗜中性粒细胞浸润方法,采用牛脏器组织淋巴细胞提取试剂盒提取牛子宫淋巴细胞,流式细胞仪鉴定淋巴细胞亚群并筛选调节性T细胞,qRT-PCR方法检测LPS刺激子宫内膜上皮细胞来源外泌体对调节性T细胞CTLA4、PD-1和Galectin-1活化因子表达影响。【结果】细胞学鉴定发现患病子宫腔液内有大量嗜中性粒细胞浸润。健康奶牛子宫腔液中仅有明显完整的脱落的上皮细胞,未见嗜中性粒细胞浸润;流式细胞术鉴定患子宫内膜炎子宫局部T淋巴细胞数量增加的同时亚群组成也发生变化,尤其Tc细胞组成比例显著升高;分选得到的调节性T细胞与LPS刺激子宫内膜上皮细胞来源外泌体共孵育极显著的降低了调节性T细胞活化基因CTLA4、PD-1和Galectin-1基因的表达。【结论】奶牛子宫内膜炎症条件下,子宫内膜上皮细胞来源外泌体是奶牛子宫局部T淋巴细胞亚群组成变化与调节性T细胞活化的一个重要诱发因子,通过抑制Treg细胞的活化,增强Tc细胞的杀伤作用导致奶牛最终繁殖效率的降低。
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