猪流行性腹泻病毒分离鉴定与实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作者：唐金明; 陈书琨; 林庆燕; 黄新亚; 卢体康; 孙洁; 阮周曦; 曾少灵; 祁振强; 吕建强; 杨俊兴; 曹琛福; 张彩虹; 刘建利; 廖立珊; 花群义; 秦智锋

来源：动物医学进展, 2014, 35(08): 31-35.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2014.08.007

• 猪流行性腹泻病毒
• 病毒分离
• 实时荧光定量RT-PCR

采用Vero-76细胞系从临床样品小肠内容物中分离到1株猪流行性腹泻病毒(PEDV),通过RT-PCR进行了鉴定。针对PEDV,参照保守的M基因序列设计了特异性引物和探针,建立了针对PEDV特异性的实时荧光定量RT-PCR检测方法(PEDV-rRT-PCR)。所建立的方法特异性强,与传染性胃肠炎病毒、轮状病毒、猪细小病毒等猪主要病原体无交叉反应;方法灵敏度高,检测灵敏度达到重组质粒10-8稀释度(约20cop);重复性好,组内变异系数≤0.26%。20份田间样品检测结果表明,所建立的PEDV-rRTPCR方法快速、灵敏,检测结果准确可靠,适合用于PEDV的快速检测和流行病学调查。

• 单位
  华南农业大学; 深圳市宝舜泰生物医药股份有限公司; 深圳出入境检验检疫局; 湖南农业大学