摘要

目的探讨siRNA沉默凋亡抑制蛋白基因对支气管哮喘小鼠气道平滑肌增殖的影响。方法将20只雌性BALB/c小鼠分为实验组和对照组,实验组构建哮喘模型,取气管和支气管进行细胞培养。对实验组和对照组培养的气道壁平滑肌细胞分别进行分组:磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(加入PBS)、错义链对照组(转染错义链)和siRNA转染组(转染siRNA Survivin),检测气道壁平滑肌细胞中Survivin基因、Survivin蛋白和caspase-9蛋白表达,检测细胞上清液中IL-6和人趋化因子(CCL5)水平。结果 RT-PCR结果显示,实验组中siRNA转染组小鼠气道壁平滑肌细胞中Survivin RNA相对表达量均低于PBS对照组和错义链对照组,气道壁平滑肌细胞中Survivin蛋白表达量均低于PBS对照组和错义链对照组,而caspase-9蛋白表达量则高于PBS对照组和错义链对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);实验组中siRNA转染组气道壁平滑肌细胞合成分泌IL-6和CCL5水平均低于PBS对照组和错义链对照组;2~4d细胞增殖量均低于PBS对照组和错义链对照组;气道壁平滑肌细胞G0/G1期比例高于PBS对照组和错义链对照组,而S/G2期比例则低于PBS对照组和错义链对照组,细胞凋亡率则高于PBS对照组和错义链对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 siRNA特异性沉默Survivin基因,可加速气道壁平滑肌细胞凋亡,有效抑制细胞异常增殖及分泌功能。

  • 单位
    河北大学附属医院