金黄色葡萄球菌SaeP蛋白表达条件的优化

作者:刘佳璐; 郑维; 范若辰; 权春善*
来源:中国乳品工业, 2020, 48(01): 14-22.
DOI:10.19827/j.issn1001-2230.2020.01.003

摘要

对金黄色葡萄球菌SaeP蛋白在大肠杆菌中的表达工艺进行优化,提高SaeP蛋白的表达量,为深入研究Sae系统对金黄色葡萄球菌产生毒力因子的机制提供支持。通过单因素法以及全面实验法确定最佳的宿主菌、诱导剂浓度、诱导温度以及诱导时间。结果表明:将通过无限克隆法(Restriction Free Cloning, RF)构建的重组质粒,转入大肠杆菌BL21(DE3)表达宿主中,用浓度为0.5 mmol/L的IPTG,在16℃条件下诱导8 h,金黄色葡萄球菌SaeP蛋白的相对表达量最高金黄色葡萄球菌SaeP蛋白的最高表达量占总蛋白的35.14%,较原诱导条件提高25.49%。