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摘要
漆酶是一种重要的绿色生物催化剂，在环境修复等领域具有广泛的应用前景。然而，漆酶易受环境因素的影响，比如pH值和温度超过适宜范围，会导致结构的破坏以及活性的快速丧失，从而使漆酶的实际应用受到限制。该文过对地衣芽孢杆菌来源的漆酶BILac（GenBank:AAU23292.2）进行了重组表达改造，利用同源建模和分子对接，针对突变底物结合能的优化和二硫键的预设构建了两个突变文库，并实现了突变文库之间的组合突变，最终筛选获得活性和热稳定性均较好提升的突变体C189A-S251C，其对底物ABTS的催化效率达到了野生型的6.3倍，T_(m)值由野生型的54 ℃提高至57 ℃，在40 ℃的半衰期由野生型的2.5 h提高至5.5 h，并且在pH稳定性和最适温度的研究中发现，该突变体提高了对酸性环境的耐受力，最适温度也从37 ℃提高到了50 ℃。这一改造将使漆酶BlLac在环境等方面上的应用潜力得到提升，同时，该研究所采用的设计策略，为蛋白质改造提供了可行的解决方案。
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