摘要
目的:构建结核分支杆菌Ag85B基因在大肠杆菌的融合表达载体,制备MBP/Ag85B融合蛋白并将其纯化。方法:常规方法构建重组表达质粒pMAL-p2-Ag85B,内切酶EcoRⅠ/HindⅢ酶切鉴定;重组表达质粒pMAL-p2-Ag85B转化大肠杆菌,经0.3mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-Dthiogalactoside熏IPTG)诱导表达产生融合蛋白(MBP/Ag85B),Westernblot鉴定表达产物。pMAL纯化树脂(Amyloseresin)对MBP/Ag85B融合蛋白纯化。结果:重组质粒pMAL-p2-Ag85B经EcoRⅠ/HindⅢ酶切后,...
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单位山东省立医院; 山东大学齐鲁医院; 山东省医学科学院基础医学研究所