微小RNA-133b-5p在缺氧复氧诱发大鼠心肌细胞凋亡中的作用

作者：韩正怡; 何淑芳; 朱海娟; 程洁; 许士进; 张野

来源：中华麻醉学杂志, 2015, 35(06): 740-743.

• 微RNAs
• 肌细胞,心脏
• 细胞凋亡
• 心肌再灌注损伤

目的探讨微小RNA-133b-5p(miR-133b-5p)在缺氧复氧诱发大鼠心肌细胞凋亡中的作用。方法大鼠H9c2胚胎心肌细胞在含10%胎牛血清DMEM/F12培养基中培养、传代。将细胞接种于96孔和6孔细胞培养板,采用随机数字表法分为4组(n=64):空白对照组(C组)正常培养24 h;缺氧复氧组(H/R)置于缺氧小室,通入95%N2-5%CO2,37℃培养箱中缺氧5 h后,用含10%胎牛血清的DMEM/F12复氧1 h;miR-133b-5p模拟物+缺氧复氧组(M+H/R组)和阴性转染+缺氧复氧组(NC+H/R)分别用miR-133b-5p模拟物(终浓度为30 nmol/L)或miR-133b-5p模拟物错义链(终浓度为30 nmol/L)孵育24 h后制备缺氧复氧损伤模型。各组处理结束后,采用实时荧光定量PCR法检测miR-133b-5p的表达水平,采用CCK-8法测定细胞活力;采用微量酶标法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性;采用Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率。结果与C组比较,H/R组、M+H/R组和NC+H/R组心肌细胞活力降低,培养液LDH活性升高,细胞凋亡率升高,H/R组和NC+H/R组miR-133b-5p表达下调,M+H/R组miR-133b-5p表达上调(P<0.05);与H/R组比较,M+H/R组心肌细胞活力升高,培养液LDH活性降低,细胞凋亡率降低,miR-133b-5p表达上调(P<0.05),NC+H/R组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论大鼠心肌细胞缺氧复氧可能通过下调miR-133b-5p表达,诱发细胞凋亡。

• 单位
  安徽医科大学第二附属医院