NOD2促进二乙基亚硝胺诱导小鼠肝组织炎症的机制研究

作者：许智玲; 张斌^*; 张顺财^*

来源：中国实验动物学报, 2021, 29(06): 730-737.

• 核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2
• 肝炎症
• 信号通路
• 机制

目的探讨肝细胞中的模式识别受体NOD2(nucleotide-binding oligomerization domain 2,NOD2)在肝炎症反应过程中的作用及机制。方法以二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine, DEN)注射的NOD2基因敲除小鼠为Nod2△hep模型组,DEN注射的B6/JNju-Nod2em1Cflox/Gpt(Nod2f/f)小鼠为Nod2f/f模型组,未注射DEN的NOD2基因敲除小鼠为Nod2△hep组,未注射DEN的Nod2f/f小鼠为Nod2f/f组。使用HE染色检测肝病理损伤,使用ALT和AST试剂盒检测血清中ALT和AST水平变化;对小鼠的肝组织进行F4/80免疫组化染色检测肝炎细胞的数量以及qPCR法检测肝细胞炎症因子的基因表达水平及肝细胞NOD2的表达水平;Ki67免疫组化染色和TUNEL染色检测DEN对肝细胞增殖及凋亡的的影响;Western Blot检测肝组织中NF-κB、MAPK和STAT3信号通路相关蛋白分子的表达。结果与Nod2f/f模型组相比,Nod2△hep模型组小鼠肝损伤情况明显减轻,表现为细胞坏死及空泡形成明显减少,血清ALT和AST水平均明显下降(P<0.01);另外与Nod2f/f模型组相比,Nod2△hep模型组中肝组织炎症因子TNF-α、IL-6、IFN-γ和IL-1β的基因表达水平、肝组织F4/80染色阳性细胞数及肝细胞的增殖及凋亡水平均明显下降(P<0.01);Western Blot表达结果表明,Nod2△hep模型组小鼠肝组织中的P38、ERK、JNK、p65以及JAK2/STAT3蛋白磷酸化水平较Nod2f/f模型组明显下降(P<0.05),而用于对照的Nod2△hep组小鼠与Nod2f/f组小鼠上述各项指标均无明显异常。结论肝NOD2缺失有减轻小鼠肝细胞炎症及坏死的作用,其机制可能与其下调肝组织NF-κB、MAPK和STAT3信号通路相关因子的表达有关。

• 单位
  复旦大学附属中山医院; 复旦大学附属中山医院青浦分院