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摘要
目的对Myh13基因敲除小鼠模型进行初步的表型分析,探讨Myh13的生物学功能。方法利用qRT-PCR和Western blotting技术检测小鼠中Myh13的表达情况;采用基因测序、q RT-PCR和Western blotting法验证Myh13敲除小鼠;统计杂合子小鼠自交产生的子代小鼠中各基因型比例;观察小鼠体质量变化趋势,并检测血液生化指标;对小鼠眼外肌进行HE染色和透射电子显微镜观察。结果在小鼠模型中,Myh13特异性高表达于眼外肌组织。经DNA、RNA和蛋白水平验证,Myh13敲除小鼠中目的基因成功剔除。杂合子小鼠子代中各基因型小鼠比例符合孟德尔遗传规律。Myh13敲除对小鼠的体质量、血生化指标无明显影响。HE染色结果提示,与野生型小鼠相比,杂合子和纯合子小鼠的眼外肌均无明显异常。电子显微镜下,杂合子和纯合子小鼠眼外肌中可见散在脂滴,并且纯合子小鼠还可见肌质网扩张的现象。结论 Myh13的敲除可改变小鼠眼外肌的微观结构,可能会影响眼外肌的功能。
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