摘要
目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞膜联蛋白Ⅱ(AnnexinⅡ)的表达影响,分析在ATRA的作用下AnnexinⅡ启动子的荧光素酶活性。方法:培养NB4细胞,用RT-PCR和Western blot技术分别检测1μmol/L ATRA作用的NB4细胞在不同时间点的AnnexinⅡ表达。构建AnneixnⅡ启动子,用电转染将重组质粒p GL4.15-AnnexinⅡ-promoter瞬时转染NB4细胞,在24 h后用1μmol/L ATRA处理转染的NB4细胞,分析AnnexinⅡ启动子的荧光素酶活性。结果:在转录水平,AnnexinⅡ的表达在48 h时逐渐下降;在蛋白水平,AnnexinⅡ的表达在24 h开始下降,而在48 h时下降明显。同时通过ATRA作用AnnexinⅡ启动子,发现ATRA可使AnnexinⅡ启动子活性下降,且随时间的延长荧光素酶活性越来越弱。结论:ATRA可诱导NB4细胞中AnnexinⅡ下调;ATRA可使转染细胞NB4中Annexin启动子荧光素酶活性随时间的延长而逐渐减弱,本研究为深入探讨其分子机制奠定了基础。
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单位兰州大学第二医院; 大连医科大学附属第二医院