摘要
目的 探讨高迁移率族蛋白(HMGB1)基因第4内含子区(1 144 bp~1 296 bp)153 bp长度片段可能的功能以及1 176 G-C突变对其功能的影响。方法 构建HMGB1基因(1 144 bp~ 1 296 bp)第4内含子区1 176GG/1 176CC的153 bp目的片段与荧光素酶报告基因载体重组质粒,应用脂质体介导的转染技术,将重组质粒与pRL-TK内参照质粒共同转染Hepa G2细胞,瞬时表达,利用双荧光素酶测试系统检测荧光素酶表达活性。结果 在HepG2细胞中,pGL3-Basic-C和pGL3-Basic-G重组质粒与pGL3-Basic荧光素酶活性无明显差异;pGL3-Promoter-G和pGL3-Promoter-C重组质粒与pGL3-Promoter荧光素酶活性相比P<0.01;pGL3-Promoter-G和pGL3-Promoter-C重组质粒荧光素酶活性相比P<0.01。结论 HMGB1基因内含子区(1 144~1 296 bp)153 bp片段具有增强子功能以及单核苷酸1 176 G-C的改变可使增强子功能大大提高。
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单位山西医科大学第一医院