构建表达Flag-GPI的重组乙型肝炎病毒载体

作者：胡孔颖; 谷陈建; 吴敏乐; 陶帅; 刘楠楠; 刘晶; 谢幼华^*

来源：微生物与感染, 2019, 14(04): 199-208.

DOI：10.3969/j.issn.1673-6184.2019.04.002

• 乙型肝炎病毒
• 5c3c
• 糖基磷脂酰肌醇
• 重组乙型肝炎病毒载体

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是小型的嗜肝DNA病毒,能够特异性地感染人肝实质细胞。HBV的易感性可以归于多个方面,包括细胞表面的受体以及细胞内的蛋白或其他因子,目前对HBV易感性的了解还有待深入。本课题利用课题组原有的HBV 5c3c载体和糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)的特性,构建了重组HBV载体5c3c-CD59-Flag-GPI和5c3cT-Flag-GPI,转染Huh7细胞后可以将Flag标签锚定在细胞膜上,且可利用Flag抗体通过流式细胞术对其进行分选。在回补HBV包膜蛋白的情况下,5c3cT-Flag-GPI能包装形成完整的重组HBV颗粒。本研究为后续优化重组HBV的包装效率,进而为HBV易感性研究提供工具并奠定基础。

• 单位
  上海市浦东医院; 复旦大学附属浦东医院; 基础医学院