无机焦磷酸化酶基因的克隆与植物表达载体的构建

作者:黄东杰; 张树珍; 冯翠莲; 顾丽红; 范海阔
来源:热带作物学报, 2007, (02): 69-73.
DOI:10.3969/j.issn.1000-2561.2007.02.015

摘要

提取面包酵母基因组DNA,用无机焦磷酸化酶(PPase)基因特异引物通过PCR扩增出864bp的片段,并将该片段克隆至pMD18-T上。序列分析结果表明,该克隆序列与GeneBank上的PPase基因序列同源性达到100%。进一步将叶肉细胞特异性启动子rbcS和PPase基因克隆至植物表达载体pCBI上,构建了由rbcS启动子调控的PPase基因植物表达载体pCBIPR。通过冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌EHA105中,为农杆菌介导的PPase基因对植物的遗传转化奠定基础。

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