白蛋白微泡促进报告基因在细胞表达的实验研究

作者:区文超; 修建成; 赖文岩; 曾平; 周忠江; 刘俭; 刘伊丽
来源:中国病理生理杂志, 2004, (04): 12-15.
DOI:10.3321/j.issn:1000-4718.2004.04.003

摘要

目的 :探讨白蛋白微泡作为非病毒载体在基因传输中的作用。方法 :6孔板培养脐静脉内皮细胞(EC)和血管平滑肌细胞 (VSMC) ,每孔加pcDNA3 1/His/LacZ质粒 2 0 μg ,加不同浓度微泡或不加微泡 ,超声条件为连续波 ,频率 2MHz,机械指数 1 8,照射时间 1min ,4 8h后计算蓝染细胞百分率和 β -半乳糖苷酶活性。另以不同浓度微泡及超声照射时间处理细胞 ,测定细胞增殖情况。结果 :与单纯超声质粒组相比 ,含微泡组蓝染细胞率增加约 10- 15倍 (其中内皮细胞组 11 6倍 ,平滑肌细胞组 15 2倍 ) ,报告基因表达定量增加近 8倍。微泡浓度为 10 %时细胞转染效率最高。超声照射对细胞增殖无影响 ,微泡浓度为 5 0 %时有明显的细胞毒作用。结论 :白蛋白微泡在超声作用下能明显增加基因的传输效率 ,有可能成为一种安全有效的基因治疗的载体。

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