蒜芥茄黄萎病抗性相关基因SsWRKY22和SsWRKY33的克隆与表达分析

作者：尹梦莹; 蔚亚楠; 龚亚菊; 桂敏; 鲍锐; 黎志彬; 吴丽艳; 杜光辉

来源：分子植物育种, 2021, 1-16.

• 蒜芥茄
• 黄萎病
• SsWRKY22
• SsWRKY33
• 表达模式

黄萎病是茄子生产中的重要病害之一，严重影响茄子的产量和品质。WRKY转录因子在植物抗病中扮演着重要的角色，但在茄子黄萎病抗性中的作用不明。本研究从黄萎病高抗材料野生蒜芥茄的转录组数据中，筛选获得WRKY家族中的SsWRKY22和SsWRKY33基因，利用PCR技术克隆获得目的基因，并对其进行生物信息学和表达模式分析。结果表明，SsWRKY22和SsWRKY33基因的ORF序列大小分别为528 bp和1 073 bp，编码175个和357个氨基酸；蛋白分子量分别为19.19 kD和40.46 kD，均属于亲水性不稳定蛋白，其中，SsWRKY22编码的蛋白属于酸性蛋白，而SsWRKY33编码的蛋白属于碱性蛋白，亚细胞定位预测两个基因编码的蛋白均定位于细胞核上；此外，SsWRKY22和SsWRKY33分别属于Ⅱ类和Ⅰ类WRKY转录因子，具有不同的蛋白结构。系统发育分析结果表明，SsWRKY22与野生潘那利番茄、番茄和马铃薯中的WRKY22亲缘关系较近；而SsWRKY33与辣椒中的WRKY33亲缘关系最近。利用qRT-PCR对SsWRKY22和SsWRKY33基因在蒜芥茄不同部位（根， 茎， 叶）的表达模式进行分析，发现二者的表达具有组织特异性，且在根部的表达量均为最高。在接种黄萎病病菌后，SsWRKY22和SsWRKY33基因在蒜芥茄根部的表达量显著下调，表明SsWRKY22和SsWRKY33可能是蒜芥茄响应黄萎病胁迫的负调控因子。本研究首次克隆了云南野生蒜芥茄的WRKY转录因子中的SsWRKY22和SsWRKY33基因并解析其表达模式，为后续SsWRKY22和SsWRKY33的功能鉴定提供基础。

• 单位
  云南省农业科学院园艺作物研究所; 云南大学