摘要
为了阐明金黄色葡萄球菌感染奶牛中性粒细胞过程中炎症介质PGE2分泌的变化及机制,本试验以体外培养的奶牛中性粒细胞为研究对象,应用金黄色葡萄球菌对其进行感染,采用RT-PCR、Western-blot检测COX-2、m PGES-1基因和蛋白的表达,ELISA检测细胞上清PGE2的分泌量。结果显示,与空白对照组(CON)相比,金黄色葡萄球菌(SA113)组感染奶牛中性粒细胞中COX-2、m PGES-1基因和蛋白的表达明显增高(P<0.001),细胞上清中PGE2的分泌量在感染后第3小时无明显变化(P>0.05),但在第6小时和第9小时分泌量明显上升(P<0.05,P<0.01),在第12小时和第24小时分泌量极显著升高(P<0.001)。为进一步证明COX-2和m PGES-1是否对PGE2的分泌产生影响,本试验加入COX-2抑制剂CAY10404和m PGES-1抑制剂MF63,使用ELISA和RT-PCR检测细胞上清中PGE2的分泌和细胞中PGE2基因的表达。结果显示,在感染后第12小时和第24小时与金黄色葡萄球菌(SA113)组相比,加入CAY10404、MF63和同时加入CAY10404、MF63抑制剂时细胞上清和细胞中PGE2的分泌及其基因的表达明显降低(P<0.001)。结果表明:在24 h内金黄色葡萄球菌感染奶牛中性粒细胞过程中COX-2和m PGES-1合成酶的基因和蛋白的表达及炎症介质PGE2的分泌都是随着细菌感染时间的增加逐渐升高且PGE2的合成和表达受COX-2和m PGES-1合成酶的影响。本试验证明了金黄色葡萄球菌可通过提高奶牛中性粒细胞COX-2和m PGES-1合成酶的表达进而促进炎症介质PGE2的分泌。
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单位内蒙古农业大学; 内蒙古自治区农牧业科学院