基因对神经母细胞瘤细胞凋亡、增殖及细胞周期的影响

作者：李建华; 刘玉峰^*; 王家勤; 郭学鹏

来源：中华实用儿科临床杂志, 2016, 31(07): 527-530.

• dead box1基因
• 神经母细胞瘤
• 细胞周期
• 凋亡
• 增殖

目的探讨dead box 1(DDX1)基因对神经母细胞瘤(NB)细胞凋亡、增殖及细胞周期的影响。方法将生长状态良好、处于对数生长期的空细胞[SK-N-BE(2)/blank]、阴性对照组细胞[SK-N-BE(2)/shV]和干扰DDX1组细胞[SK-N-BE(2)/shDDX1]接种于96孔板,每孔5 000个细胞。使用CCK-8(cell count kit 8)试剂盒分别检测12 h、24 h、36 h、48 h各组细胞的细胞数,并取平均值,以时间(h)为横坐标,450 nm处的吸光度(A)值为纵坐标,绘制出3种细胞的增殖曲线,观察DDX1对NB细胞增殖能力的影响。培养24 h后使用流式细胞仪PI染色观察SK-N-BE(2)/shV和SK-N-BE(2)/shDDX1细胞凋亡情况,以此观察DDX1对NB细胞凋亡的影响。使用流式细胞仪PI染色观察SK-N-BE(2)/blank、SK-N-BE(2)/shV和SK-N-BE(2)/shDDX1细胞各自位于G1、S、M、G2期的细胞比例,比较3组细胞周期的不同,观察DDX1对NB细胞周期的影响。结果 CCK8结果显示,SK-N-BE(2)/shDDX1细胞增殖能力明显弱于SK-N-BE(2)/blank和SK-N-BE/shV细胞,即DDX1敲低后NB细胞增殖能力减弱。流式细胞仪结果显示,SK-N-BE(2)/shV细胞总凋亡率平均值为5.28%,而SK-N-BE(2)/shDDX1细胞总凋亡率平均值为9.99%。SK-N-BE(2)/shDDX1细胞凋亡数目明显多于SK-N-BE(2)/shV细胞,即DDX1敲低后NB细胞凋亡增加。相对于SK-N-BE(2)/blank和SK-N-BE(2)/shV细胞,SK-N-BE(2)/shDDX1细胞的细胞周期阻滞,增殖能力受到影响。结论 DDX1表达受到抑制后,NB的细胞周期受到影响,细胞凋亡增加,增殖能力减弱。

• 单位
  新乡医学院第三附属医院; 郑州大学第一附属医院