一种改良大鼠肝脏Kupffer细胞分离方法

作者：张哲; 赵曙光; 倪阵; 刘震雄; 唐华; 李慧艳; 闻勤生

来源：胃肠病学和肝病学杂志, 2012, (11): 1060-1064.

• Kupffer细胞
• 细胞分离
• 原代培养
• 细胞鉴定 Kupffer cell
• Cell isolation
• Primary culture
• Cell identification

目的观察改良大鼠肝脏Kupffer细胞(KCs)分离方法获取KCs的效果。方法参照Akira提供的方法进行以下改进:①前灌注液在体灌注,Ⅳ型胶原酶离体灌注消化;②Percoll分离液不连续密度梯度离心;③台盼蓝染色检测分离细胞的活度;④选择性贴壁法纯化获取的细胞;⑤吞墨实验、DAB染色及CD163细胞免疫荧光法鉴定所分选细胞。结果肝脏KCs的获得量为(3±1.5)×105/g鼠肝,细胞活度>92%;光镜下细胞呈圆形,培养24 h后呈梭形或多角形;具有较强的吞噬能力,DAB染色呈"煎蛋"样,荧光显微镜下>99%为KCs。结论改良的大鼠肝脏KCs分离方法较Akira法能够获取更高纯度的KCs,简捷...

• 单位
  第四军医大学