铁皮石斛ACO基因片段的克隆及原核表达

作者：许轲; 潘云飞; 李欣瑶; 李欢欢; 王鑫宇; 黄建轶^*

来源：四川农业与农机, 2023, (03): 34-38.

• 铁皮石斛
• ACO
• 克隆
• 原核表达

以铁皮石斛原球茎为试验材料，采用同源克隆的方法，得到了1-氨基环丙烷羧酸氧化酶（1-aminocyclopropane carboxylate oxidase,ACO）基因的CDS区，并在NCBI数据库中进行登录（JX679494）。结果表明，铁皮石斛ACO基因大小为945 bp，它与栽培种秋石斛的ACO (Gene Bank:EF487342)的同源性高达98.9%。构建了p ET-28a-ACO原核表达载体，并转入大肠杆菌BL21 (DE3)中进行表达，SDS-PAGE检测表明获得1个55 k Da的外源蛋白。