CYP1A2低表达增强何首乌水提物及其相关单体成分肝细胞毒性的研究

作者：全正扬; 李登科; 李轶群; 王呈谕; 周明; 胡英还; 孙震晓^*

来源：中国药物警戒, 2021, 18(03): 213-219.

DOI：10.19803/j.1672-8629.2021.03.03

• 何首乌
• 肝毒性
• RNA干扰
• CYP1A2
• 没食子酸
• 芦荟大黄素

目的建立CYP1A2低表达人正常肝细胞株,探究何首乌水提物(PMR)及其相关单体成分的肝细胞毒性与CYP1A2低表达的关系。方法运用RNA干扰技术构建稳定转染shCYP1A2的2种人正常肝细胞系L02、HepaRG, RT-qPCR验证干扰效果;PMR及其相关单体成分:二苯乙烯苷(2,3,5,4’-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside,TSG)、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷(emodin-8-O-β-D-glucopyranoside,EG)、没食子酸(gallic acid,GA)、大黄素(emodin, EM)、大黄素甲醚(physcion,PH)、芦荟大黄素(aloe-emodin, AE)、大黄酸(rhein, RH)作用CYP1A2敲低的L02及HepaRG细胞48 h,MTT检测细胞活力。结果成功构建了稳定转染shCYP1A2的2种人正常肝细胞系,L02-shCYP1A2、HepaRG-shCYP1A2与相应空质粒对照组相比,CYP1A2 mRNA表达分别下降了59.81%(L02-shCYP1A2)和66.60%(HepaRG-shCYP1A2)。1.5～3 mg/mL PMR作用CYP1A2敲低的L02-shCYP1A2细胞48 h,细胞毒性显著增加(P<0.01);2.5～3 mg/mL PMR作用CYP1A2敲低的HepaRG-shCYP1A2细胞48 h,细胞毒性显著增加(P<0.05、P<0.01);40～120μmol/L GA作用CYP1A2敲低的L02-shCYP1A2及HepaRGsh CYP1A2细胞48 h,细胞毒性显著增加(P<0.01、P<0.01);AE作用CYP1A2敲低的HepaRG-shCYP1A2细胞48 h,细胞毒性显著增加(P<0.01)。结论 CYP1A2低表达显著增加PMR的肝细胞毒性,推测GA和AE可能为相关的增毒成分。

• 单位
  北京中医药大学; 生命科学学院