摘要

目的构建含有突变型SLC26A4基因和绿色荧光蛋白基因(PEGFP)的真核共表达载体,为指导临床SLC26A4相关耳聋的基因诊断及产前诊断奠定实验基础。方法通过快速定点诱变试剂盒定点突变SLC26A4基因,应用基因重组技术和限制性内切酶酶切,及基因测序方法,构建并鉴定PEGFP-SLC26A4(1517T>G)真核表达质粒。经脂质体介导转染HELA细胞系,共聚焦显微镜下观察突变型pEGFP-SLC26A4(1517T>G)真核表达质粒在HELA细胞系中的表达。结果阳性重组子经酶切鉴定含有突变型SLC26A4基因片段,基因测序结果正确。重组突变型PEGFP-SLC26A4(1517T>G)真核表...