番茄S1βCA3在防御丁香假单胞菌番茄致病变种中的功能

作者：方瀚墨; 胡璋健; 马巧梅; 丁淑婷; 王萍; 王安然; 师恺

来源：中国农业科学, 2022, 55(14): 2740-2751.

DOI：10.3864/j.issn.0578-1752.2022.14.005

• 番茄
• S1βCA
• 丁香假单胞菌番茄致病变种
• 抗病性
• 糖代谢
• 糖信号

[背景]在全球气候变化的背景下,大气CO2浓度的升高会影响植物病害的发生,进而影响农业生产.β型碳酸酐酶(β-carbonic anhydrase,βCA)是植物CO2感应和浓缩系统中的重要组成元件,参与拟南芥和烟草的植物免疫过程,但在番茄(Solanum lycopersicum)等园艺作物中的研究较少.[目的]通过探究番茄S1βCA3在抵御植物病害中的作用及机制,为番茄生产中的抗性调控提供科学依据.[方法]以拟南芥AtβCA氨基酸系列为参考序列,在番茄So1 genomics network数据库中鉴定到4个S1βCA.进一步以野生型(wild-type,WT)番茄'Ailsa Craig'(AC)为材料接种丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.toma to DC3000,Pst DC3000),利用 qRT-PCR 技术测定叶片中S1βCA的表达量,筛选出受Pst DC3000诱导表达的基因S1βCA3.在此基础上,以AC为背景,利用农杆菌介导法进行番茄遗传转化,构建S1βCA3稳定过表达植株(OE-S1βCA3).通过观察OE-S1βCA3植株接种PstDC3000后的抗性表型,明确S1βCA3在番茄抵御Pst DC3000过程中的作用.为了研究S1βCA3调控植物抗病性的内在机制,比较WT和OE-S1βCA3植株接种PstDC3000与对照条件下转录组的变化,并利用KEGG数据库对差异基因进行功能分析,推测糖代谢与S1βCA3介导的免疫反应有关.最后,通过测定WT和OE-S1βCA3植株糖代谢及其信号途径相关基因表达量以及葡萄糖、果糖和蔗糖含量,对转录组结果进行验证及分析.[结果]OE-S1βCA3植株对PstDC3000的抗性增强,接种Pst DC3000后,叶片中的细菌生长量、病斑数以及死细胞积累量明显减少.转录组测序结果显示,正常条件下,OE-S1βCA3植株转录谱没有发生明显变化;接种PstDC3000后,在WT和OE-S1βCA3植株中检测到2 100个PstDC3000诱导基因,其中有63.3％的基因在OE-S1βCA3植株中表达量更高.KEGG分析结果显示,依赖于S1βCA3过表达的Pst DC3000诱导基因富集在糖代谢相关路径中,包括淀粉和蔗糖代谢,内质网中的蛋白质加工(糖基化),氨基糖和核苷酸糖代谢,真核生物中的核糖体生物合成以及光合作用等路径.糖代谢与糖信号密不可分,qRT-PCR及糖含量测定结果显示,接种PstDC3000后,OE-S1βCA3植株叶片中糖代谢及其信号传导途径相关基因表达量与葡萄糖、果糖和蔗糖的含量较WT更高.[结论]番茄S1βCA3的过表达增强了植株对Pst DC3000的抗性,该过程可能与糖代谢及其信号通路在植物免疫中的作用有关.

• 单位
  浙江大学