沙眼衣原体包涵体膜蛋白CT225与宿主波形蛋白存在相互作用

作者：李雪燕; 贾天军^*

来源：微生物学通报, 2021, 48(02): 462-470.

DOI：10.13344/j.microbiol.china.200163

• 沙眼衣原体
• CT225
• GST下拉/沉降实验
• 质谱
• 波形蛋白

【背景】衣原体独特的发育周期是在包涵体内完成的,大约7%–10%的基因编码包涵体膜蛋白,由此可见包涵体膜蛋白可能在其发育和致病过程中发挥重要作用。然而,其具体功能仍有待深入研究。【目的】筛选包涵体膜蛋白CT225的互作分子,以期进一步了解其可能的生物学功能。【方法】首先表达融合蛋白GST-CT225,用亲和层析法从HeLa细胞裂解液中筛选CT225的互作分子,所得蛋白进行质谱分析。确定候选蛋白,然后通过免疫共沉淀方法(Co-Immunoprecipitation,CO-IP)、谷胱甘肽巯基转移酶(Glutathione S-Transferase,GST)下拉/沉降实验和亚细胞定位等方法进行验证。【结果】参考质谱分析得分,通过实验初步验证得出波形蛋白(Vimentin,VIM)为与CT225相互作用的蛋白。【结论】CT225与HeLa细胞的波形蛋白Vimentin互相作用,提示其功能可能与维持细胞骨架完整性、膜运输和脂质转运等有关。

• 单位
  河北北方学院