脊髓Pellino1敲减对长春新碱诱导大鼠神经病理性痛的影响

作者：付宝军^*; 姜静静; 黄玉琼; 林宗航; 李恒

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2021, 35(06): 427-437.

• 长春新碱
• 神经病理性痛
• 小胶质细胞
• Pellino1

目的探讨敲减脊髓Pellino1(Peli1)对长春新碱诱导大鼠神经病理性痛的影响及其机制。方法将正常大鼠行鞘内置管手术,术后随机分为干扰短发夹RNA(shscr)组和Peli1短发夹RNA(sh Peli1)组,分别于鞘内置管术后第2天(D2)至D4每天1次鞘内注射表达shscr或sh Peli1的慢病毒。将正常大鼠行鞘内置管手术,术后随机分为正常对照组、化疗诱导神经病理性痛(CINP)组、CINP+shscr组和CINP+sh Peli1组,除正常对照组外,其余各组从D5开始隔日ip给予长春新碱125 mg·kg-1(共4次)建立CINP模型,CINP+shscr组和CINP+sh Peli1组大鼠分别于D2～D4每天1次鞘内注射shscr和sh Peli1。分别采用机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL)评价大鼠机械痛觉过敏和热痛觉过敏;Western印迹法检测大鼠脊髓Peli1、小胶质细胞标志物离子钙接头蛋白1(Iba1)和星形胶质细胞标志物胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)表达水平及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)磷酸化水平;免疫荧光化学检测脊髓组织切片Iba1蛋白表达水平;RT-PCR法检测脊髓Peli1和Iba1 mRNA表达水平;ELISA检测脊髓组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β含量。结果与shscr组相比,在D12,sh Peli组MWT和TWL无明显差异,而脊髓Peli1蛋白和mRNA表达均明显下调(P<0.05)。与正常对照组比较,CINP模型组大鼠在D8,D10和D12 MWT和TWL均明显降低(P<0.01);在D12,CINP模型组大鼠脊髓组织中Peli1和Iba1蛋白及mRNA表达水平、p38 MAPK,JNK和ERK1/2蛋白磷酸化水平及脊髓匀浆中TNF-α,IL-6和IL-1β含量均明显上调(P<0.01)。与CINP+shscr组比较,CINP+sh Peli1组在D8,D10和D12,MWT和TWL明显增加(P<0.05,P<0.01);在D12,脊髓Peli1和Iba1蛋白和mRNA表达水平、p38 MAPK,JNK和ERK1/2蛋白磷酸化水平及脊髓组织中TNF-α,IL-6和IL-1β含量均明显下调(P<0.05,P<0.01)。而在D12,各组大鼠脊髓GFAP蛋白和mRNA表达均无明显差异。结论敲减脊髓Peli1明显抑制长春新碱诱导的大鼠神经病理性痛,其机制可能与抑制脊髓小胶质细胞活化和MAPK信号通路介导的炎症反应有关。

• 单位
  清远市人民医院; 广州医科大学