抑制性RNA对细胞内HCV IRES介导HCV核心蛋白表达抑制作用的定量分析

作者：梁雪松; 周永兴; 连建奇; 贾战生; 聂青和

来源：中华传染病杂志, 2004, (01): 4-6.

• 核糖体
• C型肝炎样病毒属
• 显微镜检查,共焦
• RNA,病毒

目的　定量观察核糖体内部进入位点 (Internalribosomeentrysite ,IRES)特异性抑制性RNA(inhibitorRNA ,IRNA)对细胞内HCVIRES介导的HCVC基因表达的抑制作用。方法　构建IRES特异性IRNA的真核表达载体 (pcRz IRNA) ,将该质粒与 pcHCVcluc(含HCV 5′非编码区、核心区与荧光素酶基因 )共转染人肝细胞癌 (HHCC)细胞株 ,对转染后 72h细胞表达HCVC抗原进行间接免疫荧光染色 ,用激光共聚焦显微镜对其含量进行定量分析。用荧光素酶检测试剂盒对其活性进行检测。结果　共转染细胞可表达HCVC抗原 ,同对照组相比 ,IRNA组荧光量明显下降。结论　在IRNA与HCV共转染细胞中 ,IRNA对HCVIRES介导蛋白翻译具抑制作用。

• 单位
  中国人民解放军第二军医大学; 中国人民解放军空军军医大学