大肠杆菌L-苏氨酸脱氢酶的高效表达及其酶学性质分析

作者：刘欣欣; 王瑶; 史红玲; 姚伦广; 王贤; 唐存多^*

来源：食品科学, 2023, 44(18): 85-92.

• L-苏氨酸
• L-苏氨酸脱氢酶
• 大肠杆菌
• 表达
• 生物转化

为提高L-苏氨酸脱氢酶（L-threonine dehydrogenase,L-TDH）催化L-苏氨酸脱氢合成L-2-氨基乙酸乙酯效率，通过基因挖掘的手段挖掘出来自大肠杆菌（Escherichia coli）的L-TDH，再借助pACYCDuet-1表达系统将其在E. coli BL21(DE3)中进行可溶性表达及鉴定。结果表明，L-TDH在E. coli BL21(DE3)中实现了高水平的可溶性表达，其裂解液中的酶活力为19.13 IU/mL，约为E. coli BL21(DE3)本底表达水平的79倍。纯化后的比活力为12.77 IU/mg，它的最适反应温度为45℃，最适反应pH值为9.0，在35℃和40℃保温120 min，残留酶活力仍能达到90%以上。此外，Ec TDH动力学参数也优于其他已报道的L-TDH，在转化L-苏氨酸合成2,5-二甲基吡嗪（2,5-dimethylpyrazine,2,5-DMP）的过程中具有更大优势，也为实现转化L-苏氨酸合成2,5-DMP的工业化生产奠定了理论基础。

• 单位
  河南农业大学; 南阳师范学院; 赊店老酒股份有限公司