阿伐他汀通过PTEN/mTOR信号调节糖酵解代谢逆转白血病耐药的作用及机制

作者：刘苗^*; 周攀

来源：中国实验血液学杂志, 2023, 31(01): 38-44.

DOI：10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2023.01.006

• 阿伐他汀
• 白血病耐药
• PTEN/mTOR通路
• 糖酵解

目的：探讨阿伐他汀对耐阿霉素人急性早幼粒白血病细胞系HL-60/ADM糖酵解代谢的影响及作用机制。方法：取对数生长期耐阿霉素白血病细胞HL-60/ADM，给予不同浓度阿伐他汀处理后，采用CCK-8法测定细胞增殖活性，流式细胞术检测细胞凋亡，葡萄糖消耗实验检测白血病细胞糖酵解活性，Western blot方法检测PTEN、p-m TOR、PKM2、HK2、P-gp、MRP1蛋白的表达；将PTEN-si RNA转染至HL-60/ADM细胞后，进一步采用上述方法检测PTEN低表达对阿伐他汀调节HL-60/ADM细胞凋亡及糖酵解代谢的影响。结果：CCK-8结果显示，阿伐他汀呈浓度依赖性和时间依赖性抑制HL-60/ADM细胞增殖（r=0.872,r=0.936）,10μmol/L阿伐他汀干预24 h后HL-60/ADM细胞增殖活性下降最明显，增殖活性降至（32.3±2.18）%。流式细胞术结果显示，阿伐他汀诱导HL-60/ADM细胞凋亡，该作用呈浓度依赖性（r=0.796）,10μmol/L阿伐他汀对HL-60/ADM细胞的诱导凋亡作用最强，细胞凋亡率达到（48.78±2.95）%。葡萄糖消耗实验结果表明阿伐他汀明显抑制HL-60/ADM细胞糖酵解活性，该作用呈浓度依赖性和时间依赖性（r=0.915,r=0.748）,10μmol/L阿伐他汀干预24 h后对糖酵解活性的抑制作用最强，相对葡萄糖消耗量降至（46.53±1.71）%。Western blot结果显示，给予阿伐他汀干预24 h后，p-m TOR、PKM2、HK2、P-gp、MRP1蛋白表达呈浓度依赖性降低（r=0.737,r=0.695,r=0.829,r=0.781,r=0.632），而PTEN蛋白表达呈浓度依赖性升高（r=0.531）。进一步将PTEN-si RNA转染HL-60/ADM细胞，结果显示，低表达PTEN减弱了阿伐他汀对细胞凋亡的促进作用以及对糖酵解代谢和多药耐药的抑制作用。结论：阿伐他汀能抑制白血病耐药株HL-60/ADM细胞增殖，诱导细胞凋亡，抑制糖酵解代谢，推测机制可能是通过上调PTEN表达，抑制m TOR激活，下调PKM2和HK2糖酵解代谢基因表达，从而逆转耐药。

• 单位
  武汉大学人民医院