芽胞杆菌(Bacillus sp.)YX-1耐有机溶剂葡萄糖脱氢酶的基因克隆与酶学性质

作者：张波涛; 张荣珍; 王磊; 徐岩

来源：微生物学报, 2013, (06): 561-568.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.2013.06.012

• 葡萄糖脱氢酶
• 辅酶再生
• 有机溶剂耐受性
• 底物特异性 glucose dehydrogenase
• coenzyme regeneration
• organic solvent-tolerant
• substrate specificity

【目的】从芽胞杆菌(Bacillus sp.)YX-1基因组中克隆出一种有机溶剂耐受型的葡萄糖脱氢酶基因,实现了该基因在大肠杆菌中的高效表达,研究了重组蛋白的酶学性质。【方法】依据芽胞杆菌属中葡萄糖脱氢酶氨基酸序列的保守性,设计合理引物,钓取来源于Bacillus sp.YX-1的葡萄糖脱氢酶基因,构建诱导型表达载体pET28a-gdh,于大肠杆菌中进行表达。镍柱亲和层析法纯化重组蛋白,考察了重组蛋白的酶学性质。【结果】葡萄糖脱氢酶基因全长为786 bp,编码261个氨基酸。酶学研究结果表明:该酶最适反应温度为45℃,最适pH值为8.0;具有良好的有机溶剂耐受性,于50%的辛烷、环己烷、癸烷中...

• 单位
  江南大学; 中国科学院天津工业生物技术研究所