摘要

为了研究hsa-miR-663在肿瘤细胞辐射应答通路中的功能,人工合成其前体并构建入表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-663,进一步通过BP/LR重组反应将hsa-miR-663表达框转移至诱导型表达载体pTREx-DEST30中。然后将hsa-miR-663的诱导型载体转染构建的四环素操纵子稳定表达细胞系HeLa-TetR,通过定量反转录PCR及荧光蛋白的表达检测证实了hsa-miR-663在四环素诱导时表达水平升高。本载体的构建为深入研究hsa-miR-663的功能奠定了基础。