稳定表达重组小鼠FAPα蛋白细胞株的构建

作者：张欢; 方瑞; 黄思超; 杨倩之; 杜军; 蔡绍晖

来源：生物技术通报, 2012, (05): 93-98.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2012.05.023

• FAPα
• pTd-FL-N表达载体
• G418筛选
• 稳定细胞株 FAPα pTd-FL-N expression vector G418 screening Stable cell line

采用RT-PCR方法从BALB/c胚鼠成纤维细胞克隆FAPα基因,将其连接至表达载体pTd-FL-N,转化Stbl3感受态。筛选重组质粒,经酶切、PCR检测及测序鉴定,证实表达质粒构建正确。将表达载体转染HEK293细胞,经G418筛选单克隆阳性细胞,采用Western blot技术证实稳定表达FAPα细胞株构建成功。通过流式细胞术确定FAPα蛋白可定位表达于细胞膜上。

• 单位
  中山大学; 暨南大学; 珠海市人民医院