唾液酸结合性免疫球蛋白凝集素6的生物信息学分析及多克隆抗体制备

作者：王晨阳; 徐鹏; 魏墨林; 张玮; 曹海涛^*

来源：国际检验医学杂志, 2023, 44(21): 2686-2688.

• 唾液酸结合性免疫球蛋白凝集素6
• 多克隆抗体
• 生物信息学

目的 表达并制备唾液酸结合性免疫球蛋白凝集素6(Siglec-6)的多克隆抗体，并对其特异性进行鉴定。为下一步探讨Siglec-6在介导细胞信号转导和调节造血细胞及免疫细胞的功能，研究其在免疫调节和炎症反应中的作用奠定基础。方法 通过生物信息学分析方法预测Siglec-6蛋白的跨膜结构、理化特性、疏水性等因素，设计出两个多肽，两个多肽各自与血蓝蛋白(KLH)交联后对新西兰兔进行免疫，结果发现这两个多肽均可作为抗原免疫生物试剂，并成功获得高效价的抗Siglec-6多克隆抗体。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测其效价，经过亲和层析纯化，用Western blotting测定抗体的特异度。结果 通过ELISA检测其效价分别为1∶51 200和1∶12 800,Western blot结果表明该方法所制备的抗体具有特异度。结论 该研究通过生物信息学方法成功预测了抗原表位，并据此预测成功制备了高效价、高特异度的抗Siglec-6多克隆抗体。

• 单位
  中心实验室