人胎盘提取物通过TLR4/NF-κB信号通路负调控由LPS诱导的小胶质细胞炎症反应

作者：何菁菁; 吴通前; 晏世荣; 莫诗卉; 李静; 余芳^*

来源：中国免疫学杂志, 2023, 1-22.

• 人胎盘提取物
• 脂多糖
• 小胶质细胞
• 炎症
• TLR4/NF-κB信号通路

目的：探究人胎盘提取物（human placental extracts， HPE）对脂多糖（Lipopolysaccharide， LPS）诱导的BV2小胶质细胞炎症的调控及机制。方法：通过体外培养小胶质细胞系（BV2），并分为如下四组：PBS组、HPE组、LPS组、LPS+HPE组。用CCK-8法检测BV2细胞活力；活性氧（reactive oxygen species， ROS）荧光探针检测细胞ROS水平；实时荧光定量PCR（reverse transcriptional quantitative PCR， RT-qPCR）法检测TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA水平；收集不同处理组的上清液，用Griess法检测其一氧化氮（Nitric oxide， NO）含量，流式磁珠微阵列（Cytometric Beads Array， CBA）法检测肿瘤坏死因子a（tumor necrosis factor a， TNF-α）、白介素（interleukin， IL）-1β、IL-6的分泌水平；流式细胞术检测核因子-Kappa B（Nuclear Factor- Kappa B， NF-κB）信号通路相关信号分子水平。结果：与PBS组相比，1.2 μg/mL LPS和50 ng/mL HPE显著抑制BV2细胞活性。较之PBS组，LPS组BV2细胞的TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA水平显著升高（P<0.05），上清液中NO、TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌水平亦显著上调（P<0.05），相关信号通路分子Toll样受体4（Toll-like receptors 4， TLR4）、pIκBα和pNF-κB p65表达显著增加（P<0.05）。LPS+HPE组BV2细胞较之LPS组的TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA水平，NO、TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌水平和TLR4、pIκBα和pNF-κB p65表达均显著下调（P<0.05）。结论：HPE可能通过TLR4/NF-κB信号通路负调控BV2小胶质细胞炎症。

• 单位
  中山大学附属第一医院; 贵州医科大学