成髓细胞瘤转录因子第2亚型对骨肉瘤细胞恶性行为的影响及其机制

作者：马海龙; 张春雷; 张景义; 杨昊飞; 范丛亮; 严磊; 海国栋^*

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(11).

• 成髓细胞瘤转录因子第2亚型
• 增殖
• 迁移
• 周期
• 转移

目的探讨成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2), 对骨肉瘤细胞增殖、周期、迁移、侵袭和上皮-间充质转化的影响及其机制。方法选取2017年2月至2023年2月郑州市骨科医院和河南省胸科医院手术治疗的91例骨肉瘤组织及其癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析MYBL2表达水平。采用对照慢病毒和MYBL2短发卡RNA(shRNA)慢病毒感染U2OS细胞, 建立对照组和MYBL2 KD组细胞, 采用噻唑蓝(MTT)法、EdU染色和体外移植瘤实验分析细胞的增殖能力;采用流式细胞术分析两组细胞的周期和凋亡水平;采用Transwell和蛋白质印迹法(Western blot)分析两组细胞的迁移、侵袭和上皮-间充质转化能力。组间计量数据比较采用t检验。结果癌旁组织MYBL2 mRNA表达水平(1.07±0.16)明显低于骨肉瘤组织(2.57±0.46), 差异有统计学意义(t=28.980, P<0.05)。对照组细胞吸光值(A)(1.96±0.08)明显高于MYBL2 KD组(1.57±0.14), 差异有统计学意义(t=5.983, P<0.05)。对照组细胞克隆形成率[(65.26±7.06)%]明显高于MYBL2 KD组[(34.17±4.64)%], 差异有统计学意义(t=9.015, P<0.05)。对照组细胞体内肿瘤体积[(706.06±94.28) mm3]明显高于MYBL2 KD组[(422.15±58.66) mm3], 差异有统计学意义(t=6.263, P<0.05)。对照组细胞G0/G1期比例[(20.85±2.33)%]明显低于MYBL2 KD组[(20.85±2.33)%], 差异有统计学意义(t=3.921, P<0.05)。对照组细胞S期比例[(26.45±2.07)%]明显高于MYBL2 KD组[(22.16±2.94)%], 差异有统计学意义(t=2.923, P<0.05)。对照组细胞凋亡率[(2.21±0.85)%]明显低于MYBL2 KD组[(12.90±2.23)%], 差异有统计学意义(t=10.950, P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(91.15±6.09)个]明显高于MYBL2 KD组[(53.49±12.88)个], 差异有统计学意义(t=6.474, P<0.05)。对照组细胞侵袭数量[(71.49±10.52)个]明显高于MYBL2 KD组[(42.73±5.37)个], 差异有统计学意义(t=5.996, P<0.05)。对照组细胞上皮细胞标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)[(1.10±0.10)个]明显低于MYBL2 KD组[(1.53±0.13)个], 差异有统计学意义(t=6.641, P<0.05)。对照组细胞间质细胞标志物N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)(0.91±0.06、1.12±0.09)明显高于MYBL2 KD组(0.63±0.13、0.66±0.10), 差异有统计学意义(t=4.905、8.266, P<0.05)。对照组细胞CDCA3 mRNA表达水平(1.03±0.14)明显高于MYBL2 KD组(0.74±0.08), 差异有统计学意义(t=4.495, P<0.05)。结论 MYBL2在骨肉瘤组织中呈高表达, 参与骨肉瘤细胞的增殖、周期、凋亡、迁移和侵袭等恶性细胞生物学过程。

• 单位
  河南省胸科医院; 郑州市骨科医院; 郑州大学