二妙散对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎中Th17/Treg细胞分化的影响

作者：何莲花; 栾慧杰; 何娟; 王小成; 虎义平; 王庆文^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 29(02): 66-72.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20222338

• 二妙散
• 胶原诱导型关节炎
• 辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)
• 分化

目的：观察古代经典名方二妙散(EMS)对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎(CIA)中辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)分化的影响。方法：按体质量将20只DBA/1小鼠随机分为正常组、CIA组，EMS(5.4 g·kg-1)组及甲氨蝶呤(MTX,0.5 mg·kg-1)组。CIA组、EMS组及MTX组在第1天以等体积牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠，于第21天以等体积牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂于尾根部有别于第1次免疫部位免疫DBA/1小鼠建立CIA模型(此为第2次免疫)，并于第2次免疫当天开始灌胃给药，除MTX为每周3次外，其余每天1次，共给药28 d。第22天开始观察CIA小鼠的关节红肿等症状并进行关节炎评分，第49天取材后，采用苏木素-伊红(HE)染色观察CIA小鼠关节滑膜炎症的情况；免疫荧光(IF)双标法检测CIA小鼠关节中CD4+T细胞中Th17细胞标志物白细胞介素-17(IL-17)和Treg细胞标志物叉头框转录因子P3(FoxP3)在关节滑膜中的表达情况；流式细胞术检测小鼠脾脏及淋巴结中Th17和Treg的细胞比例情况。结果：与正常组比较，CIA组小鼠关节滑膜炎症情况明显，小鼠关节结构严重紊乱，关节软骨及骨破坏明显，骨侵蚀严重(P<0.01)；小鼠关节组织中Th17/Treg值显著升高(P<0.01)；小鼠脾脏及淋巴结中Th17的细胞表达比例显著增高(P<0.01),Treg细胞表达比例显著减少(P<0.01)；与CIA组比较，EMS组和MTX组两组小鼠关节结构均相对正常，骨侵蚀、骨破坏较轻，关节面相对完整光滑；EMS组和MTX组两组中Th17/Treg值显著降低(P<0.01)；小鼠脾脏及淋巴结组织中，EMS组、MTX组Th17细胞表达比例显著降低(P<0.01),Treg细胞的表达比例显著增加(P<0.01)。结论：EMS通过调节Th17/Treg平衡，抑制CIA小鼠中Th17细胞的表达，促进Treg细胞的表达，进而治疗RA。

• 单位
  广州中医药大学; 北京大学深圳医院