摘要
目的:探究祛风宣痹方对气道上皮细胞氧化损伤的保护作用。方法:体内研究采用OVA诱导哮喘小鼠模型,体外研究采用不同浓度的H2O2及祛风宣痹方干预人气道上皮细胞系16HBE 48 h。DCFH-DA活性氧探针检测细胞中活性氧(ROS)的生成水平;MTT(噻唑蓝)法检测细胞活力;Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡水平。结果:ROS结果显示,H2O2作用后细胞内ROS生成明显增加,祛风宣痹方提取物可降低ROS水平。MTT结果显示,H2O2作用后对气道上皮细胞的抑制率随浓度增加而增大(P<0.01),祛风宣痹方水提取物和祛风宣痹方醇提取物均可减少H2O2诱导的气道上皮细胞损伤(P<0.01)。Western blot结果提示,H2O2刺激后气道上皮细胞Bcl-2蛋白表达水平显著降低,Bax蛋白表达水平增高(P<0.05,P<0.01),祛风宣痹方提取物作用后可以回调H2O2诱导的Bcl-2蛋白表达水平降低,抑制H2O2诱导的Bax蛋白表达水平增加(P<0.05)。Annexin V-FITC/PI双染法结果显示,H2O2作用后细胞凋亡和坏死水平增高,祛风宣痹方提取物可减少细胞发生凋亡和坏死的比例。结论:祛风宣痹方可以抗氧化,减少哮喘气道上皮细胞凋亡。
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单位第一临床医学院; 江苏省中医院; 南京中医药大学