奇异南星挥发油通过miR-762/NF2轴对甲状腺癌细胞恶性生物学行为的影响

作者：张慧^*; 闫旺; 孙明华

来源：实用肿瘤学杂志, 2023, 37(03): 207-214.

• 奇异南星挥发油
• 甲状腺癌
• 微小RNA-762
• 2型神经纤维瘤基因

目的 探讨奇异南星挥发油(ADVO)对甲状腺癌细胞恶性生物学行为的影响及可能作用机制。方法 用含不同浓度ADVO培养液培养甲状腺癌TPC-1细胞48 h, CCK-8法检测细胞存活率，筛选最适作用浓度；TPC-1细胞分为空白组(常规培养)、ADVO组(60μg/mL ADVO)、miR-762 mimics组(转染miR-762 mimics)、miR-762 mimics NC组(转染miR-762 mimics NC)、ADVO+miR-762 mimics组(60μg/mL ADVO+转染miR-762 mimics)、ADVO+miR-762 mimics NC组(60μg/mL ADVO+转染miR-762 mimics NC)并培养，行CCK-8法、流式细胞术、Transwell小室实验；双荧光素酶报告基因实验验证miR-762与2型神经纤维瘤(Neurofibromatosis type 2,NF2)基因的靶向关系；RT-qPCR法检测miR-762及NF2 mRNA相对表达水平；Western blot实验检测Merlin、Yes相关蛋白1(YAP1)、p-YAP1、裂解半胱氨酸蛋白酶-3(C-caspase-3)、E钙粘附蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)相对表达水平。结果 TPC-1细胞存活率随ADVO作用浓度增大而降低(P<0.05),60μg/mL ADVO浓度作用下的细胞存活率接近50%;与空白组比较，ADVO组细胞存活率、miR-762及YAP1、Vimentin蛋白相对表达水平降低，细胞凋亡率、NF2 mRNA与Merlin、p-YAP1、C-caspase-3和E-cadherin蛋白相对表达水平升高、细胞迁移及侵袭数减少(P<0.05),miR-762 mimics组细胞存活率、miR-762及YAP1、Vimentin蛋白相对表达水平升高，细胞凋亡率、NF2 mRNA与Merlin、p-YAP1、C-caspase-3和E-cadherin蛋白相对表达水平降低、细胞迁移及侵袭数增加(P<0.05);ADVO可减弱miR-762过表达的作用效果，抑制TPC-1细胞恶性生物学行为(P<0.05);经生物信息学预测和双荧光素酶报告基因实验验证，NF2基因可能为miR-762的潜在靶基因。结论 ADVO可抑制TPC-1细胞增殖、侵袭及迁移并促进其凋亡，其作用机制可能与抑制miR-762表达并提高其靶基因NF2编码Merlin蛋白水平，激活相关抑癌信号有关。

• 单位
  张北县医院; 廊坊市人民医院