可溶性VEGF受体-3原核表达载体的构建与蛋白表达

作者：杨婉华; 汪蕊; 陈睿; 马湘一; 王世宣; 卢运萍; 马丁

来源：中国现代医学杂志, 2005, (23): 3547-3550.

DOI：10.3969/j.issn.1005-8982.2005.23.007

• 可溶性受体
• VEGFR-3
• 原核表达

目的克隆并原核表达可溶性血管内皮细胞生长因子受体-3(sVEGFR-3),用于受体阻断剂的筛选及制备。方法利用RT-PCR技术从人胎盘组织中扩增VEGFR-3胞外Ⅰ～Ⅲ区cDNA片段,通过基因重组技术将该片段克隆至原核表达载体PTrcHisA中,连接产物转化大肠杆菌TOP10,IPTG诱导融合蛋白表达,纯化获得可溶性受体。结果成功构建表达载体,经IPTG诱导获得大量稳定表达的sVEGFR-3融合蛋白,纯化后获得纯度达到80%以上的可溶性受体。结论大量可溶性VEGFR-3的获得有助于进一步探索肿瘤淋巴道转移的靶向性治疗方案。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院