PA-MSHA通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌耐西妥昔单抗耐药结肠癌SW480细胞的增殖、迁移和侵袭

作者：张欢欢; 单武林^*

来源：肿瘤, 2022, 42(04): 254-264.

• 结肠肿瘤
• PA-MSHA
• 西妥昔单抗
• 细胞增殖
• 细胞运动

目的 ：研究铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血凝素（pseudomonas aeruginosa mannose-sensitivehemagglutinin,PA-MSHA）对西妥昔单抗耐药结肠癌SW480细胞（SW480-R）增殖、迁移和侵袭能力的影响，并探讨可能的作用机制。方法 ：用不同浓度的西妥昔单抗处理亲本SW480细胞和耐药SW480-R细胞，采用CCK-8法检测亲本和耐药细胞对西妥昔单抗的敏感性。用不同浓度的PA-MSHA处理SW480-R细胞，采用CCK-8法检测PAMSHA对SW480-R细胞增殖能力的影响，实时荧光定量PCR法检测对SW480-R细胞中微RNA(micro,mi R)-7-5p表达的影响，划痕愈合实验和Transwell小室法检测对SW480-R细胞迁移和侵袭能力的影响。采用脂质体转染的方法将mi R-7-5p-模拟物（mimics）转入SW480-R细胞再用PA-MSHA处理后，采用划痕愈合实验和Transwell小室实验检测mi R-7-5p过表达对PA-MSHA抑制SW480-R细胞迁移和侵袭能力的影响，最后用蛋白印迹法检测对Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路中β-catenin和E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达水平的影响。结果 ：结肠癌SW480-R细胞对西妥昔单抗的敏感性低于SW480细胞（P <0.05），成功建立对西妥昔单抗耐药的结肠癌细胞。与对照组相比，PA-MSHA可以明显抑制SW480-R细胞的增殖、迁移和侵袭能力（P均<0.01），且呈剂量依赖性。PA-MSHA刺激后，mi R-7-5p的表达水平上调（P <0.01）;mi R-7-5p过表达明显增强PA-MSHA抑制SW480-R细胞迁移和侵袭的能力（P <0.05）。蛋白质印迹法检测结果显示，PA-MSHA刺激后，Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin的表达水平下调，E-cadherin的表达水平上调（P均<0.01），提示Wnt/β-catenin信号通路的活性被抑制；mi R-7-5p过表达进一步降低β-catenin的表达水平，上调E-cadherin蛋白的表达水平（P均<0.05）。结论 ：PA-MSHA可能通过调控mi R-7-5p/Wnt/β-catenin通路抑制西妥昔单抗耐药结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭。

• 单位
  中国科学技术大学