CodY在单核细胞增生李斯特菌抗氧化胁迫中的作用

作者：杨诗怡; 林巍; 杨丽玉; 左成; 罗勤

来源：食品科学, 2020, 1-10.

• 单核细胞增生李斯特菌
• CodY
• 氧化应激
• SOS反应

目的：探究全局性转录调控因子CodY在单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes，Lm）抗氧化应激中的作用。方法：利用H2O2对处于对数中期(OD600=0.65)的Lm野生株EGDe和CodY缺失株EGDeΔcodY进行氧化胁迫，比较两菌株氧化耐受能力、抗氧化应激物（过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH））活性或含量差异；通过随机扩增多态性DNA（random amplified polymorphic DNA, RAPD）技术比较两菌株基因组模板稳定性（genomic template stability, GTS）；利用实时定量聚合酶链式反应（real-time quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR）检测两菌株抗氧化应激物编码基因以及SOS反应重要基因的转录表达变化。结果：（1） H2O2对EGDe的MIC和MBC大约是EGDeΔcodY的2倍，当H2O2浓度超过20 mmol/L时，EGDeΔcodY抑菌圈直径极显著大于EGDe（P ≤ 0.01）；（2）200 mmol/L H2O2完全抑制EGDeΔcodY生长而EGDe生长速率则有所减慢。（3） H2O2胁迫使EGDe和EGDeΔcodY中CAT酶活均下降，但转录水平并没有显著变化；SOD酶活在两菌株内无明显变化，但转录表达在EGDe和EGDeΔcodY中差异显著（P ≤ 0.001）；值得注意的是，GSH编码基因的转录表达和其含量在EGDe和EGDeΔcodY中变化趋势基本一致，随H2O2胁迫时间增加呈先显著下降后再略微上升，而且与EGDe相比，GSH在EGDeΔcodY中的转录表达水平具有极显著差异（P ≤ 0.01）。（4） EGDe和EGDeΔcodY的GTS分别为93.1%和80.0%；RT-qPCR显示EGDeΔcodY中参与SOS反应的重要基因（recA、lexA、recR、lmo1302、lmo1975）的转录表达受到极显著抑制（P ≤ 0.001），而EGDe中recA、lmo1302和lmo1975的转录表达被激活。结论：CodY缺失导致细菌在H2O2胁迫下的耐受能力和生长速率显著降低，GSH含量下降，基因组模板稳定性降低，参与SOS反应的重要基因的表达受到显著抑制，表明CodY在Lm抵御氧化胁迫中发挥了重要的调控作用。

• 单位
  生命科学学院; 华中师范大学