烷化剂耐药基因真核表达质粒的构建及在K562细胞中的表达

作者：李栋博; 王季石; 方琴; 孙海燕; 李伟达

来源：实用肿瘤杂志, 2006, (04): 312-315.

DOI：10.13267/j.cnki.syzlzz.2006.04.008

• 烷化剂
• 质粒
• 药物耐受性
• 基因表达

目的克隆烷化剂耐药基因M GM T,构建真核表达质粒并导入真核细胞进行表达,筛选稳定表达的细胞系。方法从人肝组织中克隆M GM T基因后重组构建真核表达粒质pIRES2-M GM T-EGFP并鉴定。通过脂质体法将目的基因导入K 562细胞,应用RT-PCR及W estern b lot检测目的基因的表达并筛选稳定转染的细胞克隆。结果成功克隆M GM T并构建了真核表达质粒pIRES2-M GM T-EGFP。转染细胞后M GM T在mRNA及蛋白水平均有表达,而对照组则为阴性。结论含烷化剂耐药基因M GM T真核表达质粒的构建及转染后表达的成功为烷化剂耐药基因的相关研究奠定了良好的基础。

• 单位
  纽约大学; 贵阳医学院附属医院