Frizzled4在小鼠毛囊周期中的表达

作者：陈年; 伍津津; 邱伟明; 唐辉; 唐书谦

来源：第三军医大学学报, 2014, 36(07): 631-635.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2014.07.002

• Frizzled4
• 毛囊
• 小鼠
• Wnt
• 抗体

目的探讨Wnt蛋白的受体分子Frizzled4在小鼠毛囊周期中的表达、功能及其意义。方法利用实时定量PCR、RT-PCR、Western blot和免疫荧光等技术分别检测Frizzled4 mRNA和蛋白在毛囊生长期(P1d、P3d、P8d)、退化期(P16d)和静止期(P21d)中的表达。免疫荧光技术检测Frizzled4在小鼠皮肤上皮细胞JB6 cl30-7b中的定位,MTT检测用抗Frizzled4抗体处理JB6 cl30-7b细胞后的增殖情况。结果在毛囊生长期早期,Frizzled4 mRNA和蛋白在P1d的小鼠背部皮肤中表达明显,膜表达于Bulge、毛囊外根鞘及毛球外侧。在P3d,Frizzled4蛋白表达明显上调,主要表达于Bulge、毛囊外根鞘、内根鞘、precortex、部分毛球外侧。在生长中期(P8d),Frizzled4蛋白的表达最强,集中在毛囊Bulge、外根鞘上段及内根鞘。当毛囊进入退化期(P16d),Frizzled4 mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05),此时主要定位于Bugle。而在静止期,Frizzled4 mRNA和蛋白表达最低(P<0.05),只有少量Frizzled4阳性细胞出现在毛囊Bulge。免疫荧光技术检测Frizzled4蛋白同样也在JB6 cl30-7b细胞膜中表达。MTT结果显示与对照组相比,10μg/mL的抗Frizzled4抗体处理JB6cl30-7b细胞后光密度值明显降低(P<0.05),而20μg/mL的抗Frizzled4抗体处理后的光密度值降到最低(P<0.05)。结论 Frizzled4在毛囊周期中的表达具有时空特异性。伴随着毛囊的生长,Frizzled4的mRNA和蛋白水平都呈现高表达,随着毛囊的退化而表达降低,直至静止期维持低表达水平。拮抗Frizzled4蛋白的作用促使细胞增殖受到明显抑制,提示Frizzled4的表达与毛囊细胞的增殖和分化相关。