益肾达络饮对MRS2179干预下实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的影响及机制

作者：王响; 王诗洋; 谢名宗; 何静文; 张登峰; 李丹; 王泰愚; 尚晓玲^*

来源：中华中医药杂志, 2023, 38(07): 3086-3092.

• 多发性硬化
• 实验性自身免疫性脑脊髓炎
• P2Y1
• 益肾达络饮
• MRS2179
• 神经胶质细胞源性神经营养因子
• 胶质纤维酸性蛋白
• 蛋白激酶A
• 蛋白激酶C

目的：从P2Y1受体探讨益肾达络饮治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）的机制。方法：60只C57BL/6J雌性小鼠随机分成6组：空白组、模型组、P2Y1受体拮抗剂（MRS2179）组、中药组、MRS2179+中药组、激素组。除空白组外均制作EAE模型，每日记录各组小鼠的体质量与神经功能评分。造模第4天，MRS2179组与MRS2179+中药组腹腔注射MRS2179，造模第8天开始给予相应药物连续干预14 d取材。HE染色观察各组小鼠脑与脊髓的病理改变；ELISA测定各组小鼠血清中白介素（IL）-6、IL-17、IL-23、γ干扰素（IFN-γ）的浓度；Western Blot检测各组小鼠脑及脊髓中P2Y1、细胞外信号调节激酶（ERK）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）、神经胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）、蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶C(PKC)蛋白的表达变化。结果：益肾达络饮可以减缓EAE小鼠体质量下降，降低神经功能评分，缓解脑与脊髓中的炎性浸润。与空白组比较，模型组血清中IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ浓度显著升高，脑与脊髓中P2Y1、ERK、GFAP、PKA表达显著升高，GDNF、CREB、PKC表达显著降低（P<0.05,P<0.01）。中药组明显逆转上述变化，MRS2179+中药组进一步逆转上述变化。结论：益肾达络饮的作用机制可能是通过影响中枢神经系统中的P2Y1受体活性，抑制神经炎症反应，抑制GFAP分泌，影响PKA/PKC平衡，促进GDNF的生成，从而抑制星形胶质细胞过度活化、缓解炎症、促进神经修复，缓解EAE的疾病状态。

• 单位
  基础医学院; 长春中医药大学