UPLC-MS/MS法测定人尿液中替芬泰及其代谢物浓度

作者：刘筱雪; 黄晨蓉; 薛领; 许青青; 张诗超; 张华; 钱丽芳; 蒋坤; 吴贵辉; 李星; 夏文; 缪丽燕^*

来源：中国新药杂志, 2020, 29(14): 1628-1635.

• 替芬泰
• 代谢物
• 尿液
• 超高效液相色谱-串联质谱
• 定量分析

目的:建立人尿液中替芬泰(Y101)及其代谢物M8和M9浓度的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法并用于Y101在人尿液中排泄的研究。方法:采用甲醇沉淀法进行尿液前处理并稀释后分析,色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(50 mm×2. 1 mm,1. 7μm),流动相为5 mmol·L-1醋酸铵水溶液(含0. 1%甲酸)-甲醇=57∶43(v∶v),流速为0. 3 mL·min-1,柱温为40℃,进样量为2μL。质谱采用电喷雾离子源(electrospray ionization,ESI),正离子模式,多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)方式。Y101、代谢物M8、M9和帕拉米韦(内标)的监测离子对为m/z490. 1→339. 0,m/z357. 2→105. 2,m/z373. 1→105.1和m/z329. 1→270. 2。结果:该方法选择性良好,人尿液中原型Y101、代谢物M8和M9分别在0020 0～20.0,0. 200～100和0. 030 0～10. 0μg·mL-1范围内线性良好,平均回收率分别为95. 9%～102. 2%,973%～99.3%和98. 1%～98. 5%,内标归一化基质因子分别为095～104,098～102和099～100,批内、批间精密度均<15%。同时,对Y101、代谢物M8和M9浓度分别为1500,4000和3000μg·mL-1的样本采用空白基质进行10倍稀释的稀释可靠性考察,结果表明分析物准确度为920%～1070%,精密度<5%。结论:所建立的UPLC-MS/MS分析方法专属性强、灵敏度高、重现性好,适用于人尿液样本Y101及其代谢物M8和M9的定量分析。

• 单位
  贵州百灵企业集团制药股份有限公司; 苏州大学附属第一医院