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摘要
目的探讨miRNA-30a-5p(miR-30a-5p)与异黏蛋白(MTDH)体外对人乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库数据, 分析数据库中112例乳腺癌患者癌及癌旁组织MTDH和103例乳腺癌患者癌及癌旁组织miR-30a-5p的表达情况;采用Pearson相关性分析法分析数据库中1 222例乳腺癌患者MTDH与miR-30a-5p的相关性;数据更新时间为2022年8月。将乳腺癌MDA-MB-231细胞分为阴性对照组(转染阴性对照序列)、miR-30a-5p过表达组(转染miR-30a-5p模拟物)、siMTDH组[转染针对MTDH基因的小干扰RNA(siMTDH)]、siMTDH+miR-30a-5p过表达组(同时转染siMTDH、miR-30a-5p模拟物);采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力, 采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力, Transwell法检测细胞侵袭能力, 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞miR-30a-5p、MTDH、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、波形蛋白(vimentin)和β-catenin mRNA的相对表达量, 采用蛋白质印迹法检测MTDH、N-钙黏蛋白(N-cad)、β-catenin、Snail和MMP-9蛋白的表达。结果 TCGA数据库中, 乳腺癌组织中MTDH表达水平较癌旁组织高, miR-30a-5p表达水平较癌旁组织低, 差异均有统计学意义(均P<0.001);1 222例乳腺癌患者MTDH与miR-30a-5p表达呈负相关(r=-0.134, P<0.001)。与阴性对照组比较, siMTDH组和miR-30a-5p过表达组24、48、72h细胞增殖能力均降低(均P<0.001)。miR-30a-5p过表达组、siMTDH组细胞划痕愈合率均低于阴性对照组[(61.6±1.6)%、(54.7±5.9)%比(80.3±3.0)%](均P<0.05)。迁移细胞数均低于阴性对照组[(881±50)个、(725±63)个比(1 172±66)个](均P<0.05)。与阴性对照组相比, miR-30a-5p过表达组、siMTDH组MDA-MB-231细胞MMP-2、MMP-9、vimentin和β-catenin mRNA的相对表达量均较阴性对照组下调(均P<0.05)。miR-30a-5p过表达组、siMTDH组MDA-MB-231细胞N-cad、β-catenin、Snail和MMP-9蛋白的相对表达量均较阴性对照组下调(均P<0.05)。与siMTDH组比较, siMTDH+miR-30a-5p过表达组MDA-MB-231细胞迁移数差异无统计学意义[(476±5)个比(389±46)个, t=3.37, P=0.078], siMTDH+miR-30a-5p过表达组与miR-30a-5p过表达组迁移细胞数比较, 差异亦无统计学意义[(476±5)个比(477±22)个, t=0.02, P=0.983]。结论乳腺癌组织中miR-30a-5p与MTDH表达呈负相关, 在体外, 乳腺癌MDA-MB-231细胞过表达miR-30a-5p或沉默MTDH均可抑制细胞增殖、侵袭、迁移, 但MTDH可能不是miR-30a-5p的靶基因。
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单位基础医学院; 山东医学高等专科学校; 桂林医学院; 临沂市肿瘤医院
