乙醛脱氢酶高产菌株的筛选及酶学性质

作者：汪冉; 彭政; 张娟

来源：食品与发酵工业, 2022, 1-12.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.031626

• 乙醛脱氢酶
• 热带假丝酵母
• 筛选
• 蛋白纯化

乙醛广泛存在于食品和环境中，具有高毒性、诱变性和致癌性，对人类健康有很大的危害。乙醛脱氢酶能催化多种脂肪族和芳香族的醛类转化为相应的酸，以此降低醛类物质特别是乙醛对人体的危害。以葡萄为材料，通过双硫仑抗性筛选结合酶活测定获得一株高产乙醛脱氢酶的菌株并研究乙醛脱氢酶的乙醛降解能力及酶学性质。方法：利用形态学特征及ITS rRNA基因序列的测定与分析对其种属进行鉴定。根据NADH在340 nm的吸光值变化量计算出乙醛脱氢酶活性，并通过HS-GC测定其乙醛降解能力。鉴定菌株为热带假丝酵母，命名为Candida tropicalis LBBE-W1。采用超声破碎法提取菌株LBBE-W1的粗酶液，随后分离纯化得到乙醛脱氢酶（CTALDH），比酶活为181.17 U/mg。CTALDH的最适反应温度为60 ℃，最适反应pH为8.0～9.0，其在30～60 ℃和pH 5.0～9.0下耐受2 h显示较好的稳定性。金属离子Na~(+)、K~(+)、Ba~(2+)对CTALDH的活性具有明显促进作用，Ni~(2+)、Cu~(2+)、Mn~(2+)对CTALDH具有较强的抑制作用，CTALDH的底物特异性研究表明乙醛是其最适底物。CTALDH在2 h内对乙醛的降解率达到95.12%。本研究获得了一株Candida tropicalis LBBE-W1，其产生的乙醛脱氢酶具有较高活性、稳定性和乙醛降解能力，为食品和环境中的乙醛降解提供可能。

• 单位
  生物工程学院; 工业生物技术教育部重点实验室; 江南大学