NF-κB信号通路介导羟基红花黄色素A减轻TNF-α诱导的内皮细胞EA.hy926损伤作用研究

作者：贺稳; 陈晗; 朱明明; 杨学攀; 余曦; 施洪飞^*

来源：中医学报, 2023, 38(02): 351-359.

DOI：10.16368/j.issn.1674-8999.2023.02.061

• 羟基红花黄色素A
• 内皮细胞
• 炎症反应
• 氧化应激
• NF-κB信号通路

目的：探讨羟基红花黄色素A对人重组肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞EA.hy926炎症反应和氧化应激的干预作用及其可能机制。方法：培养原代细胞株EA.hy926,采用不同浓度TNF-α(0μg·L-1、10μg·L-1、20μg·L-1、50μg·L-1)干预EA.hy926细胞建立细胞损伤模型，并采用不同浓度羟基红花黄色素A(0.1μmol·L-1、1μmol·L-1、10μmol·L-1、100μmol·L-1)进行干预，CCK-8法检测细胞活力；Hoechest染色检测细胞凋亡情况；硝酸还原酶法检测细胞上清液中一氧化氮(nitric oxide, NO)含量；ELISA法检测细胞上清液中内皮素-1(endothelin-1,ET-1)含量；Western Blot法检测E-选择素(E-selectin)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、细胞间黏附因子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)、血管细胞黏附因子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)以及核转录因子-κB(nuclear transcription factor-kappa B,NF-κB)信号通路相关蛋白的表达水平；RT-qPCR检测SOD mRNA、CAT mRNA、GSH-px mRNA的表达水平。结果：羟基红花黄色素A能明显提高TNF-α诱导后内皮细胞的活力(P<0.01),抑制细胞凋亡，增加NO释放(P<0.01),并减少ET-1含量(P<0.01),显著降低E-selectin、MCP-1、ICAM-1、VCAM-1、p-IκB-α及细胞核中P65、P50的蛋白表达水平(P<0.05),显著升高细胞中SOD mRNA、CAT mRNA、GSH-px mRNA及IκB-α蛋白表达水平(P<0.05),显著升高细胞胞浆中P65、P50的蛋白表达水平(P<0.05)。结论：羟基红花黄色素A对TNF-α诱导的EA.hy926细胞炎症反应和氧化应激具有改善作用，其机制可能与抑制NF-κB信号通路活化有关。

• 单位
  南京中医药大学; 南京中医药大学翰林学院