摘要
目的:红景天苷是从红景天的根茎部中提取得到的,是红景天中含量最高的天然活性化合物。该实验旨在研究红景天苷对人源性肝癌细胞(HepG2细胞)增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法:选取未作任何处理的HepG2细胞作为空白组,以终浓度为20、40、80μmol·L-1红景天苷处理的HepG2细胞作为红景天苷组。采用多功能细胞分析仪测定红景天苷对HepG2细胞增殖的影响,划痕实验测定红景天苷对HepG2细胞迁移能力的影响,Transwell小室实验测定红景天苷对HepG2细胞侵袭能力的影响,倒置显微镜观察红景天苷对HepG2细胞形态的影响,透射电镜观察红景天苷对HepG2细胞中线粒体的影响,流式细胞术分析红景天苷对HepG2细胞凋亡及周期分布的影响,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定红景天苷对HepG2细胞相关凋亡基因的影响,蛋白免疫印迹法测定红景天苷对HepG2细胞相关迁移、侵袭及凋亡蛋白的影响。结果:与空白组比较,红景天苷组(20、40、80μmol·L-1)细胞指数均明显下降(P<0.05),愈合面积均明显增加(P<0.05),且呈时间和浓度依赖性;红景天苷组(20、80μmol·L-1)中能够穿过Matrigel基质胶的HepG2细胞数量呈浓度依赖性减少;红景天苷组(20、40、80μmol·L-1)总凋亡率呈浓度依赖性升高,且阻滞细胞于G2/M期(P<0.05);红景天苷组(20、80μmol·L-1)上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)表达呈浓度依赖性升高(P<0.05),神经钙黏附蛋白(N-cadherin)表达呈浓度依赖性降低(P<0.05)。红景天苷组(20、40、80μmol·L-1)胱天蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Caspase-3蛋白及胱天蛋白酶-9(Caspase-9)蛋白表达均呈浓度依赖性升高(P<0.05),肌动蛋白结合蛋白(Girdin)及Bcl-2表达均呈浓度依赖性降低(P<0.05)。结论:红景天苷对HepG2细胞的增殖、迁移及侵袭均具有抑制作用,且通过线粒体途径诱导HepG2细胞凋亡。表明红景天苷可作为一种潜在的肝癌化疗候选药物。
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单位甘肃省肿瘤医院; 甘肃中医药大学; 甘肃省医学科学研究院