摘要
目的构建p16基因真核表达质粒,并鉴定其在骨肉瘤U-2OS细胞中的表达。方法提取HeLa细胞总RNA,扩增p16基因,克隆至真核表达质粒pcDNA3-HA中,构建重组表达质粒pcDNA3-HA-p16,转染U-2OS细胞,免疫荧光及Westernblot法鉴定p16/HA的表达。结果重组表达质粒pcDNA3-HA-p16经双酶切及测序证实构建正确;p16/HA在U-2OS细胞中成功表达,且主要分布于细胞核。结论成功构建了p16基因真核表达质粒,并在U-2OS细胞中成功表达。
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单位川北医学院附属医院; 重庆医科大学附属第一医院; 川北医学院