miR-22-3p靶向抑制SIRT1信号通路加重慢性阻塞性肺疾病

作者：白莉敏; 吕行; 任引刚; 祝松涛; 杨璐^*

来源：山西医科大学学报, 2023, 54(07): 944-951.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2023.07.010

• 慢性阻塞性肺疾病
• miR-22-3p
• 沉默信息调节因子1
• 核因子-κB
• 叉头盒O3a

目的 探讨miR-22-3p是否通过沉默信息调节因子1(SIRT1)信号通路影响慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发生发展。方法 将大鼠随机分为5组：对照组、模型组、antagomir-NC组、antagomir-miR-22-3p组和antagomir-miR-22-3p+EX527组，每组12只。对照组大鼠正常饲养，其他组大鼠建立香烟烟雾(CS)和脂多糖(LPS)诱导的COPD大鼠模型。CS暴露当天开始，模型组、antagomir-NC组、antagomir-miR-22-3p组和antagomir-miR-22-3p+EX527组大鼠分别尾静脉注射生理盐水、antagomir-NC、antagomir-miR-22-3p和SIRT1抑制剂EX527,每2周注射1次，CS暴露90 d内共注射6次。CS暴露90 d后，使用肺功能分析系统测定肺功能指标：最大自主分钟通气量(MVV)、0.3 s用力呼气量(FEV0.3)、用力肺活量(FVC)和最大呼气峰流速(PEF)。按照ELISA试剂盒测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)水平。按照试剂盒说明对肺组织进行苏木素伊红(HE)染色。按照试剂盒说明检测肺组织氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)]。通过RT-PCR检测肺组织中miR-22-3p和SIRT1的mRNA水平。通过Western blot检测肺组织中SIRT1、核因子-κB(NF-κB)p65、p-NF-κB p65和叉头盒O3a(FoxO3a)蛋白表达。结果 与模型组和antagomir-NC组比较，antagomir-miR-22-3p组大鼠中MVV、FEV0.3/FVC和PEF升高，BALF中IL-1β、TNF-α和MIP-2水平降低，肺组织病变减轻，肺组织中SOD和CAT水平升高，MDA水平降低，miR-22-3p水平降低，SIRT1 mRNA水平升高，SIRT1和FoxO3a蛋白水平升高，p-NF-κB p65蛋白水平降低(均P<0.05)。与antagomir-miR-22-3p组比较，antagomir-miR-22-3p+EX527组大鼠中MVV、FEV0.3/FVC和PEF降低，BALF中IL-1β、TNF-α和MIP-2水平升高，肺组织病变加重，肺组织中SOD和CAT水平降低，MDA水平升高，SIRT1 mRNA水平降低，SIRT1和FoxO3a蛋白水平降低，p-NF-κB p65蛋白水平升高(均P<0.05)。结论 沉默miR-22-3p通过上调SIRT1的表达有效提高了COPD大鼠的肺功能并减轻了肺损伤。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学